外泌体通过促进神经轴突再生治疗神经损伤性疾病(3)
八、统计学处理采用SPSS 21.0处理数据。实验数据符合正态性及方差齐性,通过单因素方差分析和Bonferroni进行多组比较。P < 0.05或< 0.05/3为差异有统计学意义。使用GraphPad构图,所有数据用表示。
结 果
一、骨髓间充质干细胞形态及鉴定
在体外,间充质干细胞表现出典型的梭形,呈放射状排列(图1A)。流式细胞仪检测结果表明,CD73和CD105抗体的阳性率分别为97.6%和77.8%,CD45、CD34和CD3的阳性率分别为0.167%、0.225%及0.139%,与间充质干细胞的标志物表达一致,表明分离提取的细胞为骨髓间充质干细胞(图1B ~ F)。
二、外泌体鉴定
对提取物进行电子透射电镜分析,可以看出提取物呈现出典型的中间有凹陷的茶托状囊泡结构,这完全符合外泌体的外形形态(图2A)。粒径分析表明,提取物的粒径为90 ~ 100 nm,这与外泌体的粒径一致(图2B)。最后通过蛋白免疫印迹法验证提取物,结果表明,提取物相对于骨髓间充质干细胞高表达ALIX及HRS表面标志物(图2C),提取物与外泌体特征一致 ......
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