2 治疗方法

    穴取关元、气海、足三里、膝眼、阳陵泉，根据病人胖瘦选用直径0.35 mm、长40～50mm不锈钢针针刺，捻转得气后，在针尾套上2 cm长的艾条，艾条距皮肤约4 cm，点燃艾条，慢慢燃烧，20分钟换一壮艾条，共灸2壮，整个治疗约40分钟。每日1次，1周为一疗程，治疗2周，中间休息1天^[1]。

    3 观察指标与方法

    (1)用Lequesne^[4]的关节疼痛量表和膝骨关节炎病情严重性指数(index of severity for osteoarthritis, ISOA)作为关节疼痛和功能状态的评定指标。

    (2)基因芯片实验及芯片数据处理及分析

    在治疗前后，分别对参加治疗的患者取血10 mL，提取mRNA保存备用。由于基因芯片价格昂贵，只对痊愈2例及显效中的2例共4例患者在治疗前及治疗后对mRNA分别进行标记，与Qiagen公司的人类基因的Oligo DNA杂交，共完成4张含21329条cDNA的芯片。然后对芯片上的数据用Lowess方法进行归一化，以差异为两倍的标准(ratio2.0)来确定差异表达基因^[2], 4张芯片的ratio中任何一张符合标准即确定该基因为差异表达基因 ......