青蒿琥酯对HSC-T6细胞PKC蛋白细胞内转位的影响
肝纤维化,肝星形细胞,蛋白激酶C,信号通路
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刘金元 杨冬娣 广州中医药大学测试中心;
【摘要】目的:探讨青蒿琥酯抗肝纤维化的作用机理。方法:将培养的肝星形细胞(HSC)-T6细胞分为阴性对照组和15mg/L青蒿琥酯组、60mg/L青蒿琥酯组、120mg/L青蒿琥酯组、240mg/L青蒿琥酯组,阴性对照组用培养液代替青蒿琥酯,其它组分别加入15mg/L、60mg/L、120mg/L、240mg/L浓度的青蒿琥酯,培养2h。通过青蒿琥酯对体外培养的HSC-T6细胞进行干预,采用免疫荧光的技术从信号转导通路的途径检测细胞因子蛋白激酶(PKC)的转位情况。结果:阴性对照组HSC-T6细胞为典型的梭形,形态正常,细胞表面可见细长的突起,没有荧光显示。15mg/L青蒿琥酯组细胞形态基本正常,见有细长的突起,但表面有些发泡,荧光显示在胞浆中;青蒿琥酯60mg/L组细胞突起变短变少,表面有些发泡,荧光显示在胞浆中;120mg/L青蒿琥酯组细胞发泡更加明显,突起变短,由梭形渐变成椭圆形,胞浆较多颗粒,荧光显示在胞浆中;240mg/L青蒿琥酯组细胞数目较少,细胞明显皱缩,荧光显示在胞浆中。结论:经过青蒿琥酯作用后,免疫荧光检测显示,未发现PKC在HSC-T6细胞内出现转位,绿色荧光显示区域主要是在胞浆内,细胞膜上没有明显荧光。青蒿琥酯作用于细胞时可能阻断了血小板源性生长因子(PDGF)/PKC的细胞内信号转导,这可能是其抑制HSC细胞增殖的重要机制之一。
【关键词】 青蒿琥酯 肝纤维化 肝星形细胞 蛋白激酶C 转位 信号通路
【基金】广东省中医药局资助课题(编号:2007342)
【分类号】R285.5
肝纤维化的发生是由细胞外基质(ECM)合成与降解的失衡造成的。细胞外基质主要来源于肝星形细胞(HSC),HSC激活并转化为肌成纤维细胞(MFB)是肝纤维化形成的关键。血小板源性生长因子(PDGF)是这一病理过程的重要细胞因子,PDGF是目前已知多肽生长因子中对HSC作用最强的有丝分裂原[
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