Ａ549细胞中过表达ｐ16引起细胞衰老样表型的研究
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[摘要] 目的 研究p161NK4A对A549肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3—p16质粒转染p16基因缺失的A549肺小细胞腺癌细胞系并通过Northertlbbt和Westembbt鉴定p16基因的异位表达，通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化，利用Westemblot和SA—p—gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化。结果 证实了在A549中p161NK4A能稳定表达。p161NK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变，Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在。发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型，如细胞体积变大，细胞形态呈明显的扁平状态，并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色。结论 在A549细胞中表达p161NK4A能使细胞发生衰老样表型并提示p161NK4A在细胞衰老中起重要作用。[关键词] 衰老； p161NK4A； A549细胞[中国图书馆分类法分类号] Q255
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