袁江 程申 李岚

    浙江省中医院 浙江 杭州 310006

    支气管哮喘可由机体内源性、外源性免疫系统共同作用引起，内毒素、感染、尘螨均可引起气道炎症[1]。调查显示，我国哮喘患者已达3000万以上，而小于3岁发病的患儿占50%，发病率、死亡率呈逐年递增的趋势[2]。目前，哮喘在临床上以药物对症治疗为主，无法避免免疫系统失衡及激素依赖等问题[3]。中草药复方在防治哮喘方面具有较大的优势，临床研究表明，给予补肾平喘方及其加减方可有效增强哮喘患儿机体免疫力，改善肺功能，具有标本兼治之效[4]。该方对小儿哮喘的改善作用及机制，目前研究仍然有限。因此，本研究探讨补肾平喘方对OVA致过敏性哮喘小鼠气道炎症的改善效果，为补肾平喘方的临床应用提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物：5周龄BALB/c小鼠，于上海西普尔-必凯实验动物有限公司购买，动物生产许可证号SCXK(沪)2018-0006。饲养于杭州鹰旸生物科技有限公司动物中心，动物使用许可证号为SYXK(浙)2020-0024。自由饮食摄水，适应性喂养1周。

    1.2 主要材料：补肾平喘方(组成：熟地20g，淫羊藿15g，附子、麻黄、桂枝、苏子、紫菀各10g，甘草5g。浸泡0.5h，经煎煮、过滤取药液，煎煮3次，合并浓缩至5g/ml，置于冰箱保存备用)；卵清蛋白(OVA)、地塞米松(货号：A8040-10、D8040，solarbio)；乙酰甲胆碱(Mch)(货号：USP-1396364，USP)；IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、TNF-α 试剂盒(货号：MM-0165M1、MM-0164M1、MM-0173M1、MM-0182M1、MM-0132M1，酶免)；IgE试剂盒(货号：CK-E30441，sino best)；NF-κB p65、IκBα、TLR4、Foxp3、GAPDH抗体(货号：ab207297、ab32518、ab95562、ab215206、ab8245，Abcam)；p-NF-κB p65、p-IκBα抗体(货号：AF2006、AF2002 ......