郑建博 王丽娜 宋其义 李继遥 牛卫东

    (1.大连医科大学口腔医学院 口腔内科教研室，大连 116044；2.口腔疾病研究国家重点实验室，四川大学；3.四川大学华西口腔医院 牙体牙髓病科，成都 610041)

    粪肠球菌(Enterococcus faecalis)是根管治疗失败患牙内最常见的细菌之一，被认为是导致根管治疗失败的一个重要因素[1]。在根管充填完善但仍有持续根尖损害的根管中，粪肠球菌的感染率为24%～77%[2]。该菌不仅可以单独引起根管内感染，而且可以与其他细菌混合引起根管内感染。粪肠球菌对常用的根管灭菌药物及抗菌药物有极强的抵抗力，临床医师往往很难用传统的治疗方法将定植于根管中的粪肠球菌彻底清除。

    细菌生物膜是由多个细菌不可逆地黏附于机体或物体表面而形成，细菌被自身细胞分泌的基质所包被，能表达一套和浮游状态下不同的基因。生物膜结构有助抵御外界因素如抗菌剂的影响，对细菌有保护作用并使细菌具有更强的致病性[3]。研究[4]表明：人类的细菌感染与生物膜有关，生物膜具有极高的耐药性和免疫逃逸能力，这一特性是许多细菌感染难以根除的重要原因之一。生物膜状态下的粪肠球菌具有更强的存活力和致病性。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料和仪器

    96孔、12孔平底组织培养板(Corning公司，美国)，BA琼脂培养基，胰蛋白胨大豆肉汤培养基(trypticase soy base，TSB)，甲醇，无水乙醇，纯甘油。MEISHENG型高频牙科X线机(上海西域科技有限公司)，Multiskan MK3型全自动酶标仪(北京平利洋医疗设备有限公司)，JSM-6360LV型扫描电镜(scanning electron microscope，SEM)(日本电子株式会社)。

    1.2 实验菌株

    2008年10月—2009年5月于四川大学华西口腔医院门诊收集根管治疗失败、需要根管再治疗患者根管内的细菌，共收集53例粪肠球菌临床株，-20℃保存于50%的甘油中[5-7]。

    1.3 病史的采集[8]

    详细记录每位患者的基本信息(包括姓名、性别、年龄、牙位、初诊时间、初诊原因)，每颗患牙的症状和体征(包括是否存在自发痛、咬合痛、叩痛，是否有牙龈脓肿和瘘道)，以及X线检查情况(包括根尖阴影的直径和原根管充填情况，是超填、欠填还是恰填)。

    1.4 粪肠球菌生物膜形成的检测[9] ......