史晓艳 陈骏 车团结 白德成 何祥一

    (1.兰州大学口腔医院 修复科；2.兰州大学生命科学院 细胞与分子生物学实验室；3.兰州大学基础医学院 甘肃省新药临床前研究重点实验室，兰州 730000)

    口腔黏膜癌是常见的口腔恶性肿瘤，占男性全身癌的8%，女性全身癌的4%，其中舌癌是最常见的口腔癌[1]。传统的手术治疗、放射及化学疗法尚存在许多不足之处，而应用微生物法预防和治疗肿瘤是口腔医学的研究热点之一。嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，L.acidophilus)属于乳酸杆菌属[2]，是口腔中的正常菌群之一，在唾液中可以分离到。引起舌癌的致病因素非常多。研究[3]证实：舌癌患者口腔微生态平衡失调，可能导致舌癌的发生。研究[4-5]表明：L.acidophilus在抗变异原性、防癌抗癌和增强机体免疫力方面均发挥了重要作用。

    本研究通过体外培养人舌癌细胞株Tca8113，研究L.acidophilus对Tca8113增殖的影响，并从诱导癌细胞凋亡及细胞内自由基、Ca2+含量角度，初步探讨其抗癌机制，为应用L.acidophilus辅助治疗口腔癌提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    L.acidophilus ATCC 4356由四川大学华西口腔医学院惠赠；人舌癌细胞株Tca8113购自中国科学院上海药物研究所；磺酰罗丹明B(sulforhodamine B，SRB)(Sigma公司，美国)；Fluo-3/AM、2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酯(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate，D-399)、碘化丙啶(propidium iodide，PI)(Molecular probes公司，美国)；分析纯二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)购自北京金亚奥国际贸易有限公司；新生小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；RPMI 1640细胞培养液、胰蛋白酶(Gibco公司，美国)；其余试剂均为市售分析纯产品。TCS SP2型激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope，CLSM)(Leica公司，德国)；酶联免疫反应检测仪(酶标仪)、JY92-Ⅱ型超声细胞粉碎机(上海分析仪器厂)。

    1.2 方法

    1.2.1L.acidophilus上清液、灭活菌液、无细胞提取物的制备 L.acidophilus在37℃条件下厌氧培养48 h ......