局部应用血管内皮生长因子及骨髓间充质干细胞对超比例随意皮瓣成活率的影响(2)
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分成A、B、C、D共4组,每组10只。A组为空白对照组,B组为VEGF组,C组为MSC组,D组为MSC+VEGF组。
1.4 动物模型的制备
以大鼠背部为术区,用脱毛剂(硫化钠、无磷洗衣粉、马铃薯粉混合制成,质量比为3∶1∶1)脱毛,常规消毒。麻醉后沿标记的2 cm×5 cm矩形皮瓣切开皮肤全层至肌筋膜上方,皮瓣纵轴与大鼠长轴平行,左右对称。将制备好的VEGF按照不同分组的设计需要分6个注射点局部注射于筋膜下,将MSC(第4、5代
细胞)培养物涂于筋膜上。
1.5 临床观察
术后每日观察实验动物是否出现腹泻、弓背、翘毛、精神萎靡及皮肤溃疡等移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的表现;同时观察皮瓣的颜色、厚度、弹性、渗出、毛发生长情况和坏死范围,以及皮瓣筋膜上血管生成情况和针刺皮瓣出血情况。
1.6 皮瓣成活百分率的测定
皮瓣坏死标准:皮瓣颜色发黑,质地坚硬,经病理检测证实发生坏死。皮瓣存活面积计算方法:术后14 d麻醉动物,用龙胆紫描画皮瓣的范围及坏
死部位,以市售硫酸纸临摹绘制,以不同颜色区分坏死与成活区域;用计数坐标纸格子数的方法计算皮瓣成活面积并换算为成活百分率,即皮瓣成活面积占整个皮瓣的比例。
1.7 组织病理学检查
术后14 d于皮瓣中轴线上距离蒂部4 cm处取皮瓣全层,常规脱水包埋、切片,苏木精-伊红(hemato-
xylin-eosin,HE)染色,于光镜下观察组织学变化。
1.8 统计学分析
采用SPSS 11 ......
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