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编号:12822096
骨形态发生蛋白—2基因修饰骨髓间充质干细胞复合对氧化聚乙烯和聚丙烯共聚物移植促进兔下颌骨牵张成骨的实验研究(2)
http://www.100md.com 2013年3月1日 周诺 黄旋平 江献芳 宋继传 李华 谢庆条
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    参见附件。

     1.4.7 苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色 将

    经10%甲醛固定的标本放入15%乙二胺四乙酸(ethy-lenediamine tetraacetic acid,EDTA)溶液(pH值7.2~7.4)中脱钙,直到用大头针能顺利穿透标本为止,后

    梯度乙醇脱水,石蜡包埋后制备成4 μm厚度的石蜡切片,600 ℃烤片1 h,二甲苯脱蜡,梯度乙醇脱水,复水后苏木素染色,1%盐酸乙醇酚化,碳酸锂返蓝,伊红染色,乙醇脱水,放干燥箱干燥,封片。在光学显微镜下观察骨组织形态学结构。

    1.4.8 免疫组织化学 将获得的脱钙标本常规石蜡包埋,二甲苯脱蜡,梯度乙醇脱水,孵育,冲洗,加一抗BMP-2,同时做不加一抗的对照片,以便于结果判读;然后加二抗,孵育,DAB显色后水洗,苏木素复染,自来水冲洗返蓝,干燥,封片。在光学显微镜下观察结果,棕黄色染色为阳性染色,免疫组织化学染色后的切片用病理图像分析仪进行测量。

    1.5 统计学分析

    采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析,对各时期各组数据行单因素方差分析和多个样本均数两两比较的q检验(Newman-Keuls法),检验水准为α=

    0.05。

    2 结果

    2.1 X线片分析

    固定2周时,A组牵张间隙新生骨组织影像密度较高,新生骨组织与原骨组织之间骨融合良好,界限非常模糊(图3A)。B组、C组及D组牵张间隙新生骨组织影像均呈现低密度影,与周围原骨组织影像界限都比较明显。B组牵张间隙内新生骨组织密度较C组、D组稍高 ......

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