粪肠球菌体外根尖生物膜模型的建立及形态学研究(1)
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[摘要] 目的 通过体外实验建立根尖生物膜模型，观察粪肠球菌根尖生物膜模型的形态及结构。方法 选取人新鲜拔除的单根离体牙24颗，随机分为8组，每组3颗，浸泡于粪肠球菌ATCC 29212菌悬液中，分别于1、2、7 d建立根尖生物膜模型。使用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜形成过程；使用碘化丙啶(PI)和刀豆球蛋白A异硫氰酸荧光素(ConA-FITC)对生物膜细菌及细胞外基质进行双染色，通过激光共聚焦扫描电子显微镜(CLSM)观察其形态和结构；计算生物膜覆盖率。结果 随时间的增加，根尖样本表面细菌覆盖面积增加，7 d组与1、2 d组间的差异存在统计学意义(P<0.05)，1 d与2 d组间的差异无统计学意义(P>0.05)。7 d组形成生物膜结构，其样本表面的覆盖率为17.23%±1.52%，样本表面有大量细菌附着，细菌被细胞外基质包绕，并呈群落分布。生物膜中的细菌被PI染成红色，细胞外基质被ConA-FITC染成绿色，可见多层次的空间结构以及亲水性通道。结论 粪肠球菌根尖生物膜于培养7 d时形成完整的生物膜结构，由细菌群落及其周围大量的不定型基质组成。
[关键词] 粪肠球菌； 根尖生物膜； 根管治疗后疾病
[中图分类号] R 780.2 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2014.04.002
粪肠球菌是根管治疗失败患牙最常分离出的细菌之一，被认为是导致根管治疗后疾病的重要因素。研究[1-3]显示，80%以上的慢性根尖周炎和持续性根尖周炎患牙的根尖牙骨质表面存在细菌生物膜。对根尖生物膜的形成及致病机制的研究[4-6]发现，粪肠球菌的生物膜结构可能使细菌具有更强的致病性 ......
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