辐射对体外培养MC3T3—E1成骨前体细胞增殖和分化的影响(2)
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使用茜素红染色测定细胞基质矿化情况。细胞以每孔5×104个的密度接种于6孔板，培养24 h后接受4、8 Gy射线照射。细胞接近融合后更换为成骨诱导培养基。辐射后第28天终止细胞培养，PBS漂洗2次，75%乙醇固定1 h。40 mmol·L-1茜素红染液(pH=4.2)室温染色20 min，PBS漂洗5次后10%氯化十六烷基吡啶溶解染色，置于分光光度仪上于570 nm处测OD值。
1.8 统计学分析
使用SPSS 16.0统计分析软件，采用单因素方差分析(one-way ANOVA)比较各组均数之间有无差异，Tukey显著差异法进行均数之间的两两比较，检验水准为双侧α=0.05。
2 结果
2.1 细胞增殖实验
细胞增殖实验结果见表2。与未辐射组相比，从辐射后第3天开始，4、8 Gy的辐射剂量均导致MC3T3-E1细胞的增殖明显降低(P<0.05)，并且这种降低呈现剂量依赖性。
2.2 细胞胶原分泌
经不同剂量的辐射后，MC3T3-E1细胞胶原分泌的染色情况见图1：随辐射剂量的增加，染色强度逐渐降低。对照组(0 Gy)、4 Gy和8 Gy组胶原定量分析的OD值分别为1.368±0.208、1.059±0.169和0.856±0.078，3组间的差异有统计学意义(F=7.738，P=0.022)，8 Gy组明显低于对照组。
2.3 成骨相关基因mRNA的表达
4种成骨相关基因的表达见表3：4 Gy以上射线可以明显抑制MC3T3-E1细胞OSX和OCN基因的表达(P<0 ......
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