丝/苏氨酸蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70 S6K信号通路在口腔鳞癌中的表达及临床意义(2)
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参见附件。
1 材料和方法
1.1 标本来源
收集2009—2011年四川大学华西口腔医院头颈肿瘤外科手术切除并经临床及病理确诊为口腔鳞癌的病例51例(口腔同时伴发其他黏膜疾病者不列入本实验，且所有病例术前均未行放疗及化疗)。其中男37例，女14例，年龄27～80岁，平均56.94岁。按组织学分化程度分为：鳞癌一级26例，二级16例，三级9例；临床分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期14例，Ⅲ期9例，Ⅳ期18例。其中18例有淋巴结转移，33例无淋巴结转移。同时随机选取其中10例，取癌旁黏膜组织标本(肿瘤边缘约1 cm的口腔黏膜组织)，作为对照组A。设置10例正常口腔黏膜组织为对照组B，其中男6例，女4例，年龄36～71岁，平均52.37岁。两组资料的性别及年龄差异均无统计学意义。所有标本在离体后常规甲醛固定，取材，逐级脱水，石蜡包埋。
1.2 主要试剂
鼠抗人p-Akt(T308)单克隆抗体、鼠抗人p-
mTOR(S2448)单克隆抗体以及鼠抗人p70 S6K(F415)单克隆抗体(南京巴傲得生物科技有限公司)，免疫组化染色试剂盒(SP-9000通用型)及浓缩型DAB试剂盒(ZLI-9031)(北京中杉金桥生物技术有限公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 标本切片 所收集的病理标本蜡块为供体蜡块，常规切片，每个标本切4 μm厚连续切片，切6张，1张行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色复查，取材不好的标本弃用。1张用0 ......
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