陈正岗?唐永平?童磊?王莹?周元?王奇民?韩金宏?何宗轩?廖奕翔樊兵?邹荣海?张健?孙晓峰?严国鑫.青岛大学医学院附属青岛市市立医院口腔医学中心，青岛?26607；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科，上海?2000；.潍坊医学院口腔医学院，潍坊?2602；.无锡市第二人民医院口腔科，无锡?2002

    体外RNA干扰RhoA基因对舌癌细胞侵袭的影响

    陈正岗1,2唐永平1童磊1王莹3周元3王奇民1韩金宏1何宗轩1廖奕翔1樊兵4邹荣海4张健4孙晓峰4严国鑫4

    1.青岛大学医学院附属青岛市市立医院口腔医学中心，青岛?266071；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科，上海?200011；3.潍坊医学院口腔医学院，潍坊?261021；4.无锡市第二人民医院口腔科，无锡?214002

    [摘要]目的 ?应用RNA干扰技术抑制人舌癌细胞株Tca8113和SCC-4中RhoA基因的表达，探讨RhoA基因表达下调对舌癌细胞侵袭的影响。方法 ?登录Genbank数据库确定人RhoA基因序列，针对RhoA的基因序列设计短链RNA，利用Lipofectamine2000介导法将RhoA-siRNA转染至舌癌Tca8113和SCC-4细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染后的舌癌细胞中RhoA?mRNA的表达，蛋白质印迹法检测RhoA、半乳糖凝集素-3(galectin-3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达，Transwell小室检测细胞的侵袭能力。结果 ?舌癌细胞转染RhoA-siRNA后，RhoA的基因和蛋白表达下降，galectin-3和MMP-9蛋白表达下降，细胞体外侵袭能力降低。结论 ?RhoA-siRNA可以有效地抑制舌癌Tca8113和SCC-4细胞中RhoA的表达，通过降低galectin-3和MMP-9的表达从而降低细胞的侵袭能力。RhoA在舌癌的侵袭和转移中可能发挥重要的作用。

    [关键词]RhoA基因； 半乳糖凝集素-3； 基质金属蛋白酶-9； RNA干扰； 舌癌； 侵袭

    舌癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一。发病率要远高于其他部位的口腔癌[1-4]，并且近年来舌癌发病率逐渐增加，发病年龄呈年轻化的趋势[5-6]。舌癌的主要临床特点是局部呈浸润性或外生性生长，极易在病变的早期发生局部淋巴结转移[7]。由于恶性肿瘤的侵袭和转移是多步骤、多阶段、多因素和多基因综合作用的结果，因此侵袭和转移机制成为目前舌癌的研究热点。

    Rho家族蛋白是小G蛋白Ras超家族成员 ......