牙龈卟啉单胞菌合成环二腺苷酸的高效液相色谱-串联质谱法定性分析
1材料和方法,2结果,3讨论
谭咏梅 杨小军 杜娟 赵望泓 陈晓丹 侯晋.南方医科大学南方医院口腔科;.南方医科大学公共卫生与热带医学学院卫生监测中心,广州 5055;.汕头大学医学院第二附属医院口腔科,汕头 5504牙龈卟啉单胞菌合成环二腺苷酸的高效液相色谱-串联质谱法定性分析
谭咏梅1杨小军1杜娟2赵望泓1陈晓丹3侯晋1
1.南方医科大学南方医院口腔科;2.南方医科大学公共卫生与热带医学学院卫生监测中心,广州 510515;3.汕头大学医学院第二附属医院口腔科,汕头 515041
[摘要]目的定性检测牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)是否能产生细菌信号分子环二腺苷酸(c-di-AMP),为探索其在P.gingivalis生命代谢以及牙周炎免疫中的作用奠定基础。方法以P.gingivalis标准菌株ATCC33277为实验菌株,抽提细菌内核酸物质作为样品,配置c-di-AMP标准品,通过高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)和高效液相色谱法(HPLC)对样品进行验证。结果HPLC-MS/MS检出限按照信噪比(S/N)3∶1计算,c-di-AMP标准品出峰的保留时间为7.49 min,P.gingivalis提取物样品在保留时间为8.82 min时有目标峰出现(大于3 S/N)。HPLC检测结果表明,P.gingivalis核酸提取物样品及c-di-AMP标准品均在15.7 min处出现目标峰,且二者的紫外吸收光谱相同。结论牙龈卟啉单胞菌核酸提取物中含有c-di-AMP,牙龈卟啉单胞菌可以合成产生c-di-AMP。
[关键词]环二腺苷酸;牙龈卟啉单胞菌;高效液相色谱-串联质谱法
Supported by: National Natural Science Foundation of China (81500870);President Foundation of Nanfang Hospital, Southern Medical University (2013Z006, 2012C005).Correspondence: Hou Jin, E-mail: houjin@smu.edu.cn.
环二鸟苷酸[bis-(3’-5’)-cyclic dimeric guano-sine monophosphate,c-di-GMP]和环二腺苷酸[bis-(3’-5’)-cyclic dimeric adenosine monophosphate,c-di-AMP]是近年来新发现的,在细菌和古细菌中广泛存在的信号分子[1-2] ......
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