林承重 刘喆麒 周文凯 季彤 曹巍

    1.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔第二门诊部，国家口腔疾病临床医学研究中心，上海市口腔医学重点实验室，上海市口腔医学研究所，上海200011；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科，国家口腔疾病临床医学研究中心，上海市口腔医学重点实验室，上海市口腔医学研究所，上海200011

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcino‐ma，OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，约占全身恶性肿瘤的3%。全球每年新发OSCC 病例超过28 万，死亡人数可达13 万[1]。虽然在过去的30年里，OSCC的诊治规范得到不断完善，但患者5 年生存率仅50%~60%，如何进一步提高患者的治疗疗效和改善生存质量是临床亟需解决的问题[2]。区域淋巴结转移一直是OSCC 治疗面临的最大难题，也被认为是影响患者预后的首要因素。探究OSCC发展及转移分子机制的特殊性，挖掘新的相关生物标志物和治疗靶点，对于提高OSCC的临床诊治效果具有重要意义。

    G 蛋白信号调节因子(regulator of G-protein signaling，RGS)2是G 蛋白偶联蛋白的抑制因子，其在各类生理功能如血压及神经功能的调节中起重要作用[3-4]。近年研究发现，RGS2 在部分恶性肿瘤如乳腺癌[5]、前列腺癌[6]及急性髓样白血病[7]等中表达显著下调，而且与肿瘤的增殖及分化有关。增强RGS2 表达能显著抑制骨髓细胞的恶性转化，而抑制RGS2 能促进前列腺癌细胞的增殖能力。RGS2 蛋白在细胞中的快速降解主要由蛋白质泛素化相关E3 连接酶复合体的介导[8]，RGS2 在OSCC中的生物学功能及其作用机制尚无文献报道，本研究旨在通过TCGA数据库分析以及OSCC细胞系的细胞生物学研究，探讨RGS2 在OSCC 中的作用，并通过泛素化水平分析探索RGS2 在OSCC 中的调控机制。

    1 材料和方法

    1.1 细胞及培养

    人OSCC细胞系(HN4、HN6、HN30、Cal-27、SCC-9、Fadu)和人胚胎肾细胞HEK293T 由上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面头颈肿瘤实验室提供，永生化角质形成细胞株HaCaT购自中国科学院(北京)细胞库，细胞培养于含10%小牛血清的高糖改良杜氏伊格尔培养基(Dul‐becco's modified Eagle media，DMEM)，置于37 ℃、5%CO2的培养箱中。

    1.2 主要试剂 ......