电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化
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摘要：目的 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因优经悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件。方法 通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件，采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K562和NB4，用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率。结果 (1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞，细胞类型不同条件有所差异，K562细胞在250V、950μF得到最大转染率40.6%，NB4细胞在350V、950μF得到最大转染率32.9%。(2)良好的细胞生长状态能明显提高转染率。(3)温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大。结论 电穿孔是一种高效的基因转染法，通过优化其条件，可提高转染率。
关键词：电穿孔；悬浮细胞；基因转染；优化
中图分类号：R733.7文献标识码：A文章编号：1000-5749(2004)01-0040-04
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