人ｌａｍｄａ3干扰素(ｈＩＦＮ—λ3)基因克隆及表达
 |
| 第1页 |
参见附件(319KB，4页)。
摘要：目的 构建表达hIFN—L3基因的真核表达载体，并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN—λ3蛋白。方法 用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞，抽提总RNA，经RT-PCR获得全长cDNA，与pcD—NA3.1/myc—his(—)A真核表达载体连接，构建重组体pcDNA3.1A-hIFN—λ3，并在COS-7细胞中进行表达，采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。结果 经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确，而且确为hIFN—λ3，与GeneBank报告序列完全一致，并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN—λ3蛋白。结论 该研究成功地克隆出hIFN—λ3基因编码序列，并在COS-7细胞中获得瞬时表达，证明了rhIFN—λ3蛋白具有抗病毒活性，为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。
关键词：hIFN—λ3；RT-PCR；基因；克隆；表达；COS-7细胞
中图分类号：R977.6；R978.7 文献标识码：A 文章编号：1673—0399(2005)01—0023—04
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(319KB，4页)。