人胶质细胞源性神经营养因子(ｈＧＤＮＦ)成熟肽基因的克隆及原核表达
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摘要：目的 分离人胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)成熟肽基因，并在E.coil中获得表达。方法 以人的白细胞基因组DNA为模板，合成特异引物，采用PCR技术分离得到hGDNF成熟肽基因，并构建表达载体pET—21a(+)—hGDNF，转化大肠杆菌BL21(DE3)，分别用IPTG和乳糖诱导表达，SDS-PAG正电泳检测hGDNF蛋白表达。结果 PCR扩增出了400 bp的DNA片段，构建的表达载体pET—21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现400bp左右的条带，测序结果正确，用IPTG或乳糖诱导转化菌均有15 kd大小的目的条带，表达的目的蛋白占菌体总蛋白30%以上，以包涵体形式存在。结论 克隆得到人GDNF成熟肽基因并在大肠杆菌中得到了高效表达。
关键词：hGDNF；基因表达
中图分类号：R977.6；R394.8 文献标识码：A 文章编号：1673—0399(2005)01—0034—04
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