白血病细胞系中ＷＴｌ基因启动子区域ＤＮＡ甲基化的研究
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摘要：目的 应用基于聚合酶链反应(PCR)的实验方法，研究白血病细胞系中WTl基因启动子区域的DNA甲基化水平及其与WTI基因表达的关系。方法 采用RT—PCR技术及甲基化特异性PCR(methy，ation-specificPCR，MSP)技术，检测HL-60、Jurkat及KG—1等白血病细胞系中WTl基因mRNA表达水平及其启动子区域的DNA甲基化状态；以5—杂氮脱氧胞嘧啶(5—aza-CdR)对启动子区域DNA高甲基化的U937细胞系进行去甲基化处理后，观察WTI基因表达水平的改变。结果 HL-60、K562、KG—1、NIM及SHI-1细胞系中WTl水平高表达，而Jurkat和U937细胞表达水平极低，同时检测到这两个细胞系存在WTl基因启动子区域DNA高甲基化；经去甲基化处理后，U937细胞系的WTl基因表达水平较未处理者升高。结论 WTI基因启动子区域DNA高甲基化是抑制其表达的机制之一。
关键词：WTI；白血病；DNA甲基化；MSP
中图分类号：R557 文献标识码：A 文章编号：1673—0399(2005)02-0175—03
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