重组人ｓＣＤ40Ｌ功能性片段在大肠杆菌中的表达
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摘要：目的 克隆sCD40L功能性片段(E107—L261)基因并在大肠杆菌体系进行表达。方法 从CD40L胞外段全长基因通过PCR方法扩增出sCD40L功能性片段(E107-L261)的基因，并在其N端融合6个组氨酸(His)；经PCR、酶以及DNA测序证实；将融合得到的sCD40L基因插入pET30a表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)表达体系进行诱导表达。结果 构建了pET30a-sCD40L原核表达载体；将转化菌BL21(DE3)诱导表达后经SDS-PAGE电泳以及Western Blotting鉴定显示在18kd处有sCD40L-功能性片段(E107-L261)的高效表达。结论 sCD40L功能性片段基因的克隆及其表达为进一步研制其同源三聚体形式的功能性重组蛋白奠定了基础。
关键词：CD40配体；大肠杆菌；表达
中图分类号：R378.21;R392—33 文献标识码：A 文章编号：1673—0399(2005)03—0376—03
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