杨淑先，赵新霞，牛坡(.河南省食品药品检验所，郑州市450003；.河南省人民医院，郑州市450003)

    林可霉素利多卡因凝胶为外用半固体抗菌制剂，需要控制微生物限度。但由于该制剂中林可霉素为水溶性的抗菌成分，可抑制微生物的生长，因此，不能通过常规法进行该药品的微生物限度检查；另由于凝胶为水溶性的基质，但具有一定的黏度，直接用薄膜过滤法也难以去除抗菌成分。因此，需建立合适的方法对该样品进行微生物限度检查。笔者通过反复探索，经多次试验，最终选用以0.05 mol·L-1的四硼酸钠溶液[1]为稀释剂，采用薄膜过滤法进行本品的微生物限度检查。方法学验证结果表明，该方法有效、可行，可用于林可霉素利多卡因凝胶微生物限度检查。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    HTY-2000A集菌仪(杭州泰林医疗器械厂)；离心机(上海浦东物理光学仪器厂)；一次性使用薄膜过滤器(北京牛牛基因技术有限公司)；PYX-DHS细菌培养箱、MJ-160B霉菌培养箱(上海跃进医疗器械厂)。

    1.2 菌种

    枯草芽孢杆菌 [CMCC(B)63 501]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]、大肠埃希菌[CMCC(B)44 102]、白色念珠菌[CMCC(F)98 001]、黑曲霉[CMCC(F)98 003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104]均来源于中国药品生物制品检定所。

    1.3 培养基[2]

    营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、营养肉汤培养基、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基均由中国药品生物制品检定所提供。

    2 方法与结果

    2.1 菌液的制备[3]

    接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，培养22 h；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养24 h。上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1 mL含菌数为50～100 cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上 ......