黄 凌，朱 毅，邝少轶(1.海南医学院药学院药理教研室，海口市 571101；.海南省药品检验所，海口市57016)

    帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种中老年人常见的神经系统变性疾病，主要病理改变是中脑黑质致密部(SNc)多巴胺(DA)能神经元选择性地死亡、缺失，致纹状体DA不足，从而导致基底节神经调节功能的紊乱，在临床上表现为静止性震颤、肌强直、运动迟缓和姿势不稳等。目前PD的病因尚未清楚，一般认为是由遗传、年龄、环境、氧化应激免疫异常、兴奋性氨基酸毒性、线粒体功能障碍等多种因素所致的中脑SNc DA能神经元死亡，而细胞凋亡是这种细胞死亡的主要方式。因此，对神经元的保护和抗细胞凋亡的治疗已成为PD治疗的主要思路之一。

    近年来，在动物实验研究中证实益智仁具有良好的脑保护作用，可用于老年性痴呆及其他智能障碍类疾病的治疗，对神经细胞有抗氧化、抗衰老、减轻兴奋性毒性和抗凋亡作用[1，2]。笔者前期实验研究结果表明[3，4]，益智仁的重要化学成分挥发油具有对抗PD模型小鼠行为学改变，减轻氧化应激反应，提高PD模型小鼠抗活性氧的防御能力，并且在减少凋亡起始因子表达的同时促进抗凋亡因子的表达的作用，本研究旨在进一步探讨益智仁挥发油是否具有减轻PD模型小鼠脑内组织和神经元的受损程度，抑制神经细胞凋亡的作用，为寻求具有防治PD作用的天然药物提供理论依据和数据支持。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    烤箱(佛山市高明温雅精密烤箱有限公司)；BX41型显微镜(日本Olympus公司)。

    1.2 试药

    干燥益智仁购于海南省万宁县益智(GAP)种植与产业化开发示范基地，经海南省药品检验所中药室鉴定为真品。1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP，美国Sigma公司)；司来吉兰(南京思科药业有限公司，批号：100911)；甲苯氨兰染色剂、兔抗小鼠酪氨酸羟化酶(TH)、半胱氨酸酶-3(Caspase-3)多克隆抗体、链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫组化试剂盒、TUNEL细胞凋亡试剂盒、DAB显色试剂盒均购于武汉博士德生物工程研究所。

    1.3 动物

    SPF级C57BL小鼠，10～12周龄，♂，体重24～30 g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供(动物生产许可证号：SCXK(沪)2003-0002)。所购动物普通饮食喂养5 d后开始实验，控制室温为(22±2)℃，湿度为(55±15)% ......