吴 欣，蒋文勇，刘 倩，于 黔(贵阳市第一人民医院肾内科，贵阳 550002)

    糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)作为糖尿病最主要的微血管慢性并发症[1]，是导致终末期肾病最常见的原因，目前尚无有效的预防和干预手段。因此，致力于发现新的相关因素和找到新的可延缓DN进展的治疗方法已成为近年的研究热点。转分化后的肾小管上皮细胞丧失原有的上皮细胞表型，获得肌成纤维细胞(MyoF)的新特征，特异性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)是MyoF的标志物。由肾小管上皮细胞转分化而来的MyoF具有更强的分泌细胞外基质(ECM)的能力[2]，肾小管上皮细胞转分化是肾间质MyoF的重要来源。有研究[3]已经证实骨化三醇可通过干预免疫调节而发挥肾脏保护作用。本研究复制DN大鼠，通过观察骨化三醇对模型大鼠肾小管间质中MyoFα-SMA和ECM重要成分纤维连接蛋白(Fibronectin，FN)的表达情况，探讨骨化三醇对DN大鼠肾小管间质损伤的保护作用及其可能机制。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    HPIAS 1000高清晰度彩色病理图像测量系统(武汉千屏影像有限责任公司)；强生血糖仪(美国强生公司)；7170A型全自动生化分析仪(日本日立公司)。

    1.2 试药

    骨化三醇(上海罗氏公司，批号：J20100056，规格：每粒0.25 μg)；链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司，批号：S040103，规格：每支1 g)；兔抗大鼠α-SMA多克隆抗体、兔抗大鼠FN多克隆抗体和免疫组化试剂盒(福建迈新生物工程有限公司)；总RNA抽提试剂(Trizol，美国Invitrogen公司)；反转录-聚合酶链式扩增(RT-PCR)试剂盒(上海申能生物工程有限公司)。

    1.3 动物

    SD大鼠28只，♂，体重200～280 g，购买并饲养于贵阳医学院实验动物中心，实验动物合格证号：SCXK(黔)2006-0002。

    2 方法

    2.1 分组与建模

    取大鼠28只，适应性喂养14 d后，随机选取20只大鼠单次腹腔注射STZ 60 mg·kg-1(STZ溶于新制备的0.1 mol·L-1枸橼酸盐缓冲液)建立DN模型，其中4只大鼠未成模，给予剔除，造模成功的16只大鼠随机分为模型组和干预组，每组8只。将剩余8只正常大鼠分为正常对照组。干预组在成模后立即灌胃给予骨化三醇0.03 μg·kg-1·d-1[4](骨化三醇溶于橄榄油制备成混悬液)；模型组灌胃给予等量橄榄油；正常对照组灌胃给予等量蒸馏水 ......