邹素兰，胡 楠(常州市第一人民医院药剂科，江苏常州 213003)

    糖尿病状态下Caco-2细胞CYP3A4和P-gp功能的变化及其机制研究Δ

    邹素兰*，胡 楠(常州市第一人民医院药剂科，江苏常州 213003)

    目的：考察糖尿病状态下Caco-2细胞色素P450(CYP)3A4和P糖蛋白(P-gp)功能的变化及其机制。方法：分别在Caco-2细胞中加入25、50、100 μmol/L咪达唑仑(CYP3A4探针底物)温孵15、30、60、120、180 min，加入0.1、0.2、0.4 μg/ml罗丹明123(P-gp底物)温孵15、30、60、90、120 min，以确定底物浓度及温孵时间；在Caco-2细胞中加入不同浓度胰岛素、葡萄糖和脂肪酸(软脂酸和油酸)后测定咪达唑仑的代谢产物1′-OH咪达唑仑的生成量和罗丹明123的摄取量，以考察对细胞CYP3A4和P-gp功能的影响。结果：底物浓度分别为咪达唑仑50 μmol/L、罗丹明123 0.1 μg/ml，均温孵2 h。随着胰岛素、葡萄糖、软脂酸浓度的升高，1′-OH咪达唑仑的生成量降低，CYP3A4活性降低；罗丹明123的摄取增加，P-gp外排功能降低。油酸对1′-OH咪达唑仑的生成量和罗丹明123的摄取量没有显著影响。结论：糖尿病状态下，胰岛素、葡萄糖和软脂酸水平的升高均可降低CYP3A4和P-gp的功能，但油酸对CYP3A4和P-gp的功能影响不大。

    糖尿病；Caco-2细胞；CYP3A4；P糖蛋白；胰岛素；葡萄糖；脂肪酸；体外试验

    1 材料

    1.1 仪器

    Synergy2荧光酶标仪(美国Bio-tek公司)；VCX130超声破碎仪(美国SONICS公司)；LC-10ADVP高效液相色谱(HPLC)仪，包括SCL-10A系统控制器、SIL-10ADVP自动进样器、LC-10AT泵、CTO-10A柱温箱、RF-10A XL荧光检测器(日本岛津公司)；HW-2000色谱工作站2.12版(南京千谱软件有限公司)；LC-20AD HPLC系统、2020 HPLC-质谱(MS)联用系统(日本岛津公司)。

    1.2 药品与试剂

    咪达唑仑(MDZ)对照品(中国食品药品检定研究院，批号：171250-200401，纯度：99.0%)；1′-OH咪达唑仑(1′-OH MDZ)对照品(美国Sigma公司，货号：UC430，纯度：98.0%)；地西泮对照品(中国食品药品检定研究院，批号：171225-200903 ......