王友俊，张玲美(莱芜钢铁集团有限公司医院传染科，山东莱芜 271126)

    前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞中VEGF和eNOS表达的影响

    王友俊*，张玲美(莱芜钢铁集团有限公司医院传染科，山东莱芜 271126)

    目的：研究前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)中血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响。方法：将HPMECs分为A组(正常培养)、B组(3%O2培养)、C组(3%O2培养+15 μg/L前列地尔)及D组(3%O2培养+45 μg/L前列地尔)，相应培养24 h。观察各组细胞形态，MTT比色法检测细胞活力(以吸光度计)，流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blot法检测细胞中VEGF、eNOS相对表达量。结果：A、D组细胞密度较高，B、C组细胞密度较低。与A组比较，B、C、D组细胞活力降低、凋亡率升高、VEGF与eNOS表达增强、eNOS/VEGF减少(P<0.05)。与B组比较，C、D组细胞活力增加、VEGF表达减弱(P<0.05)；D组细胞凋亡率降低、eNOS表达减弱、eNOS/VEGF增加(P<0.05)。与C组比较，D组细胞凋亡率降低、VEGF表达减弱、eNOS/VEGF增加(P<0.05)。结论：前列地尔可能通过上调HPMECs的eNOS/VEGF发挥保护作用。

    前列地尔；缺氧损伤；人肺微血管内皮细胞；血管内皮生长因子；内皮型一氧化氮合成酶

    缺氧可以导致肺血管内皮功能障碍，引起肺血管强烈收缩及血管平滑肌细胞大量增生，促进缺氧性肺动脉高压的发生[1]。血管内皮生长因子(VEGF)可以诱导血管内皮细胞增殖、血管内皮增厚、动脉血压升高；内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)具有较强的心血管保护作用，可以抑制血管内皮细胞增生及血管平滑肌迁移，防止肺动脉高压进展[2-3]。既往研究发现，前列地尔的扩血管作用能降低慢性阻塞性肺病并肺动脉高压患者的肺动脉压力，但其机制尚未明确[4]。为此，本文从VEGF和eNOS角度研究前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)的影响机制。

    1 材料

    1.1 仪器

    CX41奥林巴斯显微镜(上海西努光学科技有限公司)；FC500 MCL/MPL流式细胞仪、Gallios流式细胞仪(美国贝克曼库尔特有限公司)；3-18R高速冷冻离心机(湖南恒诺仪器设备有限公司，离心半径：6 cm)；DG5033A酶标仪(南京华东电子集团医疗装备有限责任公司)；Image-Pro Insight图像分析软件(广州市明美光电技术有限公司) ......