高效液相色谱-电化学法测定人尿液中儿茶酚胺的浓度
检测器,氧化铝,1材料,2方法与结果,3讨论
陈 静,丘宏强(1.泉州医学高等专科学校药学系,福建泉州 36000;.福建医科大学附属协和医院药学部,福州 350001)高效液相色谱-电化学法测定人尿液中儿茶酚胺的浓度
陈 静1*,丘宏强2(1.泉州医学高等专科学校药学系,福建泉州 362000;2.福建医科大学附属协和医院药学部,福州 350001)
目的:建立测定人尿液中儿茶酚胺浓度的方法。方法:尿液样品经氧化铝提取后,以3,4-二羟基苄胺为内标,采用高效液相色谱-电化学法测定,色谱柱为Shim-Pack C18,流动相为混合溶液[每500 ml混合溶液中含离子对试剂(辛烷磺酸钠)0.5 mmol、甲醇10 ml、0.06 mmol/L二正丁胺50 μl、无水乙酸钠2.0 g、柠檬酸5.5 g、乙二胺四乙酸二钠60 mg和氯化钠584.4 mg,pH=3.5],流速为0.8 ml/min,柱温为30℃,电化学检测器检测电压为750 mV,进样量为40 μl。结果:去甲肾上腺素和肾上腺素的尿药浓度均在3.125~100 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.998 5和0.999 2),定量下限均为3.125 ng/ml;日内、日间RSD均<10%;方法回收率分别为99.2%~101.6%、98.9%~100.5%,提取回收率分别为63.8%~66.8%、60.5%~62.6%。结论:本方法特异性强、灵敏度较高、检测成本低,可用于人尿液中儿茶酚胺浓度的测定。
儿茶酚胺;去甲肾上腺素;肾上腺素;高效液相色谱法;电化学检测器;尿液
去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)和肾上腺素(Epinephrine,E)是人体内重要的儿茶酚胺类(Catecholamines,CAs)物质,与人们的健康和疾病有着密切的关系[1]。人体内CAs水平不仅可作为嗜铬细胞瘤的诊断依据,也有助于原发性高血压的鉴别诊断[2];此外,嗜铬细胞瘤患者在药物麻醉、分娩及手术等情况下可能发生高血压或休克[3],故检测此类患者体内CAs水平具有重要的临床意义。目前,对体内CAs水平的检测多采用血液样本,而血液中儿茶酚胺的质量浓度易受多种因素(如紧张、应激及低血糖等)的影响,且采血时静脉穿刺引起的疼痛也可导致患者CAs血药浓度升高[4]。因此,临床通过检测患者CAs的尿药浓度,可获得更为稳定、可靠的结果[5]。本试验在此基础上,建立了一种适用于临床且操作简便的CAs尿药浓度检测方法,以期为临床提供参考。
1 材料
1.1 仪器
LC-20A型高效液相色谱(HPLC)仪 ......
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