胡华钟，王仲萍，陈亦清，朱秋连，林彩燕，严鹏科#(.广州医科大学附属第三医院药学部，广州 5050；.广州同鹏中旭医药科技有限公司，广州 5050)

    人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素含量测定的HPLC法的建立及应用Δ

    胡华钟1*，王仲萍2，陈亦清2，朱秋连1，林彩燕1，严鹏科1#(1.广州医科大学附属第三医院药学部，广州 510510；2.广州同鹏中旭医药科技有限公司，广州 510510)

    目的：建立人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素(RAPA)含量的测定方法，研究RAPA靶向制剂(RAPA-NP-Apt)对泡沫细胞的靶向作用。方法：以氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞建立泡沫细胞模型，取200 ng/mL的RAPA和200、400、800 ng/mL的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共同孵育60 min。采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内RAPA含量，色谱柱为Diamonsil C18，流动相为乙腈-水(90∶10，V/V)，流速为1.0 mL/min，柱温为40℃，检测波长为278 nm，进样量为20 μL。结果：RAPA检测质量浓度线性范围为50～6 400 ng/mL(r＝0.999 96)，平均回收率为98.72%(RSD＝0.62%，n＝3)，日内、日间RSD均不大于6.15%(n＝6)，稳定性试验的RSD<2%(n＝6)，重复性试验的RSD＝1.64%(n＝6)。RAPA和低、中、高质量浓度的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共孵育后RAPA的含量分别为12、43、98、140 ng/106个细胞。结论：本方法操作简单，稳定性和重复性好，可用于泡沫细胞内RAPA的含量测定。RAPA-NP-Apt可提高RAPA对泡沫细胞的靶向作用。

    高效液相色谱法；雷帕霉素；含量测定；靶向药物；泡沫细胞

    雷帕霉素(RAPA)是一种疏水性大环内酯类免疫抑制剂，能特异性抑制冠脉支架置入后血管平滑肌细胞的过度增殖，降低冠脉支架置入后再狭窄的发生率[1]。但该药物全身给药对再狭窄疗效不佳，故一直采用药物涂层于支架的方法，局部用药治疗动脉粥样硬化(Athero-sclerosis，AS)病变。由于给药方式、剂量、给药时间受限等因素，易造成晚期支架内血栓形成和支架内再狭窄等临床安全性问题[2-4]。

    泡沫细胞的形成是AS早期的标志，在AS的发生发展中具有重要的作用。本课题组已将前期研究获得的特异性靶向泡沫细胞的适配子与雷帕霉素纳米粒构建成靶向纳米给药体系，旨在替代现有的抗再狭窄药物涂层于支架的靶向模式 ......