2.5 肝组织中AQP8 mRNA表达

    采用反转录PCR(RT-PCR)法检测肝组织中AQP8 mRNA表达。取肝组织100 mg，加入到1 mL Trizol试剂中，于冰上匀浆，提取总RNA，紫外-可见分光光度计测量其浓度和纯度，电泳检测其完整性。调整RNA质量浓度为 1 ?g/?L，将其反转录成 cDNA。扩增引物序列：AQP8上游引物为5′ -ATATGTCTGGGGAGCAGACGC-3′ ，下游引物为5′ -GGCTGCAGGAGCCCAGTATT- 3′ ，扩增产物片段长度为211 bp；大鼠β-actin上游引物为5′ -CCAAGGCCAACCGCGAGAAGATGAC-3′ ，下游引物为5′ -AGGGTACATGGTGGTGGCGCCAGAC-3′ ，扩增产物片段长度为587 bp。反应体系：Taq DNA聚合酶1 μL， dNTPs 2 μL，上樣染料2 μL，稳定剂、优化剂、反应缓冲液共25 μL，反转录反应产物2 μL，上、下游引物各2 μL，最后加水补至50 μL ......