2.3 胸主动脉斑块面积检测

    采用苏木精-伊红(HE)染色法检测各组小鼠胸主动脉斑块面积。分离各组小鼠胸主动脉组织0.2 g，置于液氮中速冻保存，备用。将胸主动脉置于4%多聚甲醛/0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS，pH=7.2，下同)中固定，用石蜡包埋，常规切片(厚度约4 μm)，经HE染色后，置于荧光倒置显微镜下观察其胸主动脉斑块形成情况，并采用Image J 1.41软件测量斑块面积(粥样硬化斑块阳性判定标准为：细胞内膜显著增厚、内皮细胞排列紊乱、脂质浸润明显；经HE染色后，斑块呈红色，且较其他部位明显增厚)，计算校正斑块面积=(内弹力膜围绕面积-管腔面积)/内弹力膜围绕面积×100%。

    2.4 胸主动脉组织中NF-κB p65、Cav-1、eNOS蛋白表达水平检测

    采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组小鼠胸主动脉组织中NF-κB p65、Cav-1、eNOS等蛋白的表达水平。取各组小鼠胸主动脉组织适量，研磨，以3 000 r/min离心5 min后，弃去沉淀。取上清液至聚丙烯酰胺凝胶中，恒压电泳(电压：90 V)3 h，转膜，用PBS清洗4次，每次5 min，加入5%BSA封闭液适量，于37 ℃下封闭1 h ......