2.1.3 凋亡蛋白表达量检测 采用Western blotting法检测。取对数生长期的细胞适量，以5×104个/mL的密度按2 mL/孔接种至6孔板中，培养24 h。将细胞随机分为对照组、模型组和EGCG低、高剂量组(100、200 μmol/L，剂量设置参考“2.1.2”项检测结果)，每组设3个复孔。吸取各孔上清液，对照组和模型组加入完全培养基2 mL，各给药组加入含相应药物的完全培养基2 mL，继续培养48 h。除对照组外，其余各组细胞均按“2.1.1”项下方法复制心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注3 h后，裂解细胞，采用BCA法测定蛋白浓度。蛋白经变性后，进行SDS-PAGE电泳，然后转移至PVDF膜上，以5%脱脂奶粉室温封闭2 h，用TBST溶液洗膜10 min×3次;加入相应一抗[GAPDH的稀释度为1 ∶ 5 000，Bcl-2、Bax的稀释度均为1 ∶ 1 000]，4 ℃孵育过夜;用TBST溶液洗膜10 min×3次，加入相应二抗(稀释度为1 ∶ 5 000)，室温孵育2 h;TBST溶液洗膜10 min×3次 ......