2.1.2 重组质粒转化及阳性克隆筛选 将“2.1.1”项下重组质粒通过冷刺激法转化到感受态大肠杆菌BL21(DE3)菌株中;取已转化菌株，接种至含有100 ng/mL Amp的TB培养基(以下简称“含Amp培养基”)中，于37 ℃条件下倒置培养12～16 h。对培养所得单菌落进行基因测序，取测序结果证实为阳性的菌株继续培养，提取重组质粒，转化到表达态大肠杆菌Rosetta gami菌株中。转化后的表达菌株进行复苏培养后，取适量，接种至含100 μg/mL Amp、15 μg/mL卡那霉素、34 μg/mL克林霉素的LB培养基中，于37 ℃倒置培养至对数生长期，挑取单菌落进行基因测序，检测判断是否转化成功。

    2.1.3 重组蛋白的表达 挑取“2.1.2”项下经基因测序证实转化成功的菌株，接种至含Amp的LB培养基，置于100 mL培养瓶中，于37 ℃下以220 r/min摇床培养过夜。取培养完毕的菌液，按1%的体积比接种至含Amp的LB培养基，于37 ℃下以220 r/min摇床培养至对数生长期时，加入终浓度为1 mmol/L的诱导剂IPTG，在37 ℃下诱导蛋白表达3 h。将表达完毕的菌液以5 000 r/min离心5 min ......