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编号:13527155
采用基因芯片技术研究丹红注射液对急性心肌梗死模型大鼠基因表达谱的影响(3)
http://www.100md.com 2019年11月15日 《中国药房》 201922
     2.2 组织取材

    末次给药2 h后,以颈椎脱臼法处死大鼠。取出心脏,剪开右心耳,经腹主动脉用磷酸盐缓冲液(PBS,pH为7.2~7.4)清洗2次,每次50 mL。保留左心室游离壁部分,剪去发白梗死区,取梗死边缘区心肌组织约50 mg,用锡箔纸包裹后,放入冻存管中,于液氮中速冻30 min后,转入-80 ℃超低温冰箱保存,待检。

    2.3 总RNA提取和纯化

    使用QIAzol Lysis组织样本裂解试剂裂解大鼠心肌梗死边缘区组织,以异丙醇沉淀法[15]提取其总RNA;使用miRNeasy Mini Kit试剂盒按其说明书方法进行纯化。

    2.4 miRNA基因芯片检测

    采用分光光度计分别于260、280 nm波长处检测总RNA的吸光度(A),若其A260 nm/A280 nm值为1.8~2.0则表明RNA纯度较高[16]。采用生物分析仪对总RNA进行凝胶电泳分析,通过对比电泳条带灰度值来计算总RNA的分子完整数(RIN)及28S/18S ......
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