美洲大蠊提取物逆转人肝癌细胞HepG2/ADM多药耐药的机制研究(4)
2.8 美洲大蠊提取物对HepG2/ADM细胞中酶介导MDR途径中相关基因mRNA及其蛋白的影响考察2.8.1 对酶介导MDR途径中相关基因mRNA表达的影响 参照“2.7.1”项下方法测定细胞中TopoⅡ、GST-π mRNA表达水平。其中,GST-π上游引物序列为5′- AGTCTCCTCGGTTCCCAAGCAA-3′,下游引物序列为5′-GGTGCTGGTTAAAGAGTTCGCC-3′,扩增产物大小为132 bp;TopoⅡ上游引物序列为5′-TTAATGCTGCGGACAACAAACA-3′,下游引物序列为5′-CGACCACCTGTCACTTTCTTTT-3′,扩增产物大小为217 bp;其余试验条件均与“2.7.1”项下相同。
2.8.2 对酶介导MDR途径中相关蛋白表达的影响 参照“2.7.2”项下方法检测细胞中Topo Ⅱ、GST-π蛋白表达水平。其中,一抗的稀释比例均为1 ∶ 200;其余试验条件均与“2.7.2”项下相同。
2.9 统计学方法
采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析 ......
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