何文栋 苏雯清 韦坤华 奎玲 王硕 龚小妹 杨晓男 缪剑华

    中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)10-1196-09

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.10.07

    摘 要 目的：研究染料木素对人鼻咽癌CNE1细胞生长的抑制作用并预测其可能的作用靶点。方法：采用CCK-8法检测0(空白对照)、12.5、25、50、100、150 ?mol/L染料木素分别作用24、48、72 h对CNE1细胞增殖的影响;分别采用流式细胞术检测0(空白对照)、15、30、60 ?mol/L染料木素作用24 h对CNE1细胞周期、凋亡的影响;采用划痕实验检测0(空白对照)、10、20、30 ?mol/L染料木素作用24 h对CNE1细胞迁移能力的影响。采用高通量测序法挖掘0(空白对照)、30 ?mol/L染料木素作用24 h后CNE1細胞中的差异基因，并通过实时荧光定量-聚合酶链式反应法(RT-qPCR)对上述细胞实验相关差异基因mRNA的表达情况进行验证。结果：与空白对照比较，12.5、25、50、100、150 ?mol/L染料木素对细胞的增殖均有显著的抑制作用(P98%)购自成都瑞芬思生物科技有限公司;胎牛血清购自美国Thermo Fisher Scientific公司;含0.25%乙二胺四乙酸(EDTA)的胰蛋白酶消化液(批号20181218)购自北京索莱宝科技有限公司;CCK-8试剂盒(批号20200720)购自杭州弗德生物科技有限公司;RPMI 1640培养液、细胞周期检测试剂盒(批号20201118)、荧光素FITC标记的膜联蛋白V(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒(批号20200610)均购自江苏凯基生物科技股份有限公司;总RNA提取试剂盒(批号10029777)购自美国BioLabs公司;MGIEasy RNA文库制备试剂盒(批号A0002)、MGIEasy DNA纯化磁珠(批号A0212)和BGISEQ-500RS高通量测序试剂盒(批号A20)均购自深圳华大智造科技股份有限公司;cDNA反转录试剂盒(批号N20426)、RT-qPCR反应试剂盒(批号O10318)均购自北京全式金生物技术有限公司;其余试剂均为分析纯或实验室常用规格 ......