郑薇 ，郎静 ，黄西凤 ，肖锐 ，白荷 ，贾济 #(.中国人民解放军南部战区总医院麻醉科，广州 5050；.中国人民解放军西部战区总医院骨科，成都 60083)

    巨噬细胞过度激活与多种炎症相关疾病的发生发展密切相关，包括川崎病、自身免疫性肝病、肾病和心肌疾病等[1—3]。巨噬细胞过度激活后，可释放多种促炎性细胞因子，包括肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β，IL-1β)和IL-6等。上述促炎性细胞因子可通过血液循环损伤体内多个脏器，继而造成脏器功能受损，甚至危及生命[4]。因此，可通过抑制巨噬细胞的过度激活，降低炎症反应水平，进而控制相关疾病的发生发展[5]。

    绿原酸是富含于中药金银花中的一种苯丙素类化合物，具有抗炎、抗氧化、抗过敏和利胆等药理作用[6]。目前，关于绿原酸的相关研究多聚焦在抑制炎症反应方面。有研究报道，绿原酸的抗炎机制包括抑制巨噬细胞/小胶质细胞激活和调节p38分裂原激活的蛋白激酶/Toll样受体等细胞信号通路[7]，但其详细抑炎机制尚不明确。骨髓细胞2表达的触发受体(triggering receptors expressed on myeloid cells-2，TREM2)是表达于巨噬细胞上的一种蛋白，可调控巨噬细胞激活程度，抑制炎症反应[8]。本研究使用经典致炎物质脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞，模拟巨噬细胞激活[9]，观察绿原酸对LPS所致巨噬细胞激活的影响和TREM2在其中的作用，为阐明绿原酸的抗炎机制提供实验室证据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    Series 2型细胞培养箱购自美国Thermo Fisher Scientific公司；Infinite 200型酶标仪购自瑞士Tecan公司；Criterion型电泳仪和GelDoc Go型凝胶成像系统均购自美国Bio-Rad公司；FV10i型共聚焦显微镜购自日本Olympus公司。

    1.2 主要药品与试剂

    绿原酸原料药(批号327-97-9，纯度>95%)、DMEM细胞培养基(批号D5796)、胎牛血清(批号9014-87-7)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)(批号67-68-5)和MTT(批号298-93-1)均购自美国Sigma-Aldrich公司；TNF-α、IL-1β和IL-6促炎性细胞因子检测试剂盒(批号分别为20220314、20220517、20220418)均购自中国南京建成生物工程研究所；兔抗小鼠诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase ......