DNA定量分析对宫颈细胞学ASCUS进行分流的临床价值
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【摘要】目的：将DNA定量分析及常规细胞学与病理组织学诊断结果进行比较研究，评估DNA定量对宫颈常规细胞学ASCUS进行分流的临床价值。方法：选取常规细胞学为ASCUS和DNA定量分析为可见DNA倍体异常患者进行阴道镜下宫颈活检，对有病理结果的46例患者进行对比分析。结果：ASCUS同时伴有DNA倍体异常患者病理活检提示CINⅠ以上占86%； ASCUS不伴有DNA倍体异常患者病理活检提示CINⅠ以上占9.5%；常规细胞学未见异常而DNA倍体出现异常患者病理活检提示CINⅠ以上占63.5%。结论：DNA倍体分析可对常规细胞学ASCUS进行分流，尤其是可见3个以上异倍体细胞时，应积极干预，行阴道镜下宫颈活检。
【关键词】常规细胞学； DNA倍体； 宫颈病变
【中图分类号】R711.32【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2012)09-0160-02
宫颈细胞学检查是检测宫颈癌及癌前病变的主要方法。在发达国家，有性生活的妇女每年或每两年进行一次宫颈癌的普查已有十至几十年的历史，从而使宫颈癌的发病率及死亡率明显下降。近2年，我计生中心在端州区育龄妇女开展计生三查活动的同时，对2208名妇女进行宫颈细胞学检查。本研究通过与常规细胞学比较，探究DNA定量分析对宫颈细胞学ASCUS进行分流的临床价值。
1资料与方法
1.1一般资料： 2009年10月至2011年9月，我计生中心与佛山市第二人民医院细胞DNA定量分析中心合作，在我中心门诊自愿行宫颈病变筛查妇女共有2208人，选取常规细胞学为ASCUS和DNA定量分析为可见DNA倍体异常患者进行阴道镜下宫颈活检，有病理结果的共46例进行分析，年龄(41.84±3.07)岁。
1.2取材方法：取材前3天不做阴道冲洗及阴道用药，24h内禁止性生活，并在非经期取材。妇科医生取材时用窥阴器暴露宫颈，手持宫颈刷的刷柄，通过扩阴器，将刷头中央较长的刷丝从子宫颈外口插入子宫颈管内约8mm处，周边刷丝顶部抵触子宫颈黏膜面，顺时针或逆时针旋转3～5圈，取出宫颈刷后，拔脱刷头，刷头向下垂直浸泡于样本收集管固定液内，旋紧管盖后贴上标签。
1.3 样本处理：采集的标本送佛山市第二人民医院病理科细胞DNA定量分析中心行液基薄层制片及染色，经化学和物理处理，每例制成2张薄层细胞学片 ，1张进行巴氏染色做常规细胞学诊断，另外1张进行Feulgen染色做DNA定量测定。检查报告由佛山市第二人民医院病理科提供。
1.4细胞学诊断：所有巴氏染色片经有经验的病理医生读片。根据TBS诊断分为5级：①正常或良性；②不明意义的非典型鳞状上皮(ASC)；③低级别鳞状上皮内病变(LSIL)；④高级别鳞状上皮内病变(HSIL)或原位癌(CIS)；⑤鳞状上皮浸润癌。
1.5细胞DNA定量分析：所有Feulgen染色片用AcCell全自动细胞图像分析系统进行扫描处理，分析结果有3种：(1)可见少量：1或2个异倍体细胞；(2)可见：3～10个异倍体细胞；(3)可见大量：>10个异倍体细胞。
1.6阴道镜及病理学检查：对常规细胞学为ASCUS和DNA定量分析为可见DNA倍体异常患者，均在阴道下经5%醋酸染色后对可疑部位四点以上活检，每例活检的病理切片由经验丰富的病理科医生做出病理诊断。病理结果分为：炎症，CINI，CINII，CINIII以及癌。
2结果
2.1常规细胞学与DNA倍体分析比较： 2208名检查妇女中，常规细胞学诊断及DNA倍体正常2132人，常规细胞学诊断异常和DNA倍体异常76人，异常发生率为3.4%。其中细胞学异常同时伴有DNA倍体异常44人，占58%；细胞学异常不伴有DNA倍体异常21人，占28%；细胞学未见异常而DNA倍体出现异常11人，占14%。
2.2常规细胞学提示ASCUS与病理活检分析比较： 本研究对常规细胞学提示ASCUS及细胞学未见异常而DNA倍体出现异常的46例患者进行阴道镜下宫颈活检，结果发现：14例ASCUS同时伴有DNA倍体异常患者病理活检提示CINⅠ以上12例，占86%，炎症2例，占14%；21例ASCUS不伴有DNA倍体异常患者病理活检提示CINⅠ以上2例，占10%，炎症19例，占90%；11例常规细胞学未见异常而DNA倍体出现异常患者病理活检提示CINⅠ以上7例，占64%，炎症4例，占36%。
3讨论
宫颈癌在我国是仅次于乳腺癌的妇科肿瘤，现在有年轻化的趋势，早期诊断宫颈癌最有效的方法是子宫颈细胞学检查。临床上对常规细胞学诊断为ASCUS患者较难处理。《子宫颈癌筛查异常妇女处理的共识指南(2006版)》提出：间隔6个月连续两次重复细胞学检查、HPV检测和单次阴道镜检查，均为处理ASCUS安全且有效的方法[1]。本研究对每例样本制成2张薄层细胞学片，其中1张巴氏染色做常规细胞学诊断，另外1张Feulgen DNA染色做DNA定量测定，避免了患者重返诊室进行重复检测的恐惧。
附表：常规细胞学提示ASCUS与病理活检分析比较
常规细胞学病理活检炎症 CINICINII CNIII合计 异常比例ASCUS伴有DNA倍体异常 2 11 1 0 14 86%ASCUS不伴有DNA倍体异常 19 2 0 0 21 10%细胞学无异常DNA倍体异常 4 7 0 0 11 64%DNA定量测定生物学背景[2]： DNA非整倍体的出现是遗传基因变异所致的，也是染色体异常改变的标志，象征着染色体结构和数量出现异常变化，也是细胞恶变的早期特征。DNA作为遗传物质，其结构和功能的异常，是细胞恶变的分子基础。细胞的非整倍体与恶性密度是密切相关的，几乎在所有的实体肿瘤中都能证实这一点，因此，DNA非整倍体改变是宫颈癌病变的一个客观、早期、特异性的指标，并能预测具有恶性发展趋势的上皮病变 ......
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