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编号:12710365
前列腺癌相关风险位点rs1800477在LNCaP细胞系功能研究(2)
http://www.100md.com 2015年3月1日 《医学美学美容·中旬刊》 2015年第3期
     用含有10%胎牛血清的培养液进行常规培养,放置于37℃,5%CO2 的恒温培养箱。为保证细胞的正常生长,细胞液隔天进行更换。实验分为4组,(1) 空白对照组(CON): 正常LNCap细胞未感染任何病毒的细胞组; (2) 阴性对照组(NC):正常LNCap细胞加阴性对照病毒感染的细胞组; (3) 野生型组(OE-wt):正常LNCap细胞加目的基因BCL2野生型病毒感染的细胞组; (4) 突变型组(OE-mu):正常LNCap细胞加目的基因BEL2突变型病毒感染的细胞组。

    1.5划痕实验

    按照实验设计分为4组,往96孔板中加入约5X104个经慢病毒感染后的LNCap细胞。第2天上午换无血清培养基,使用划痕仪对准96孔板的下端中央部位,向上轻推形成划痕。使用无血清培养基轻轻漂洗2遍,加入无血清培养基,拍照0h。放入37℃5% CO2培养箱培养。培养8~24h后取出,荧光显微镜拍照(以96孔中心阴影区域为参照,划痕在图片的正中)。在0,6,24h进行图像采集和细胞迁移距离的测量,将采集的图像通过Image-Pro5.0软件,计算各个时间点细胞未覆盖的面积 ......
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