鱼腥草抗补体活性多糖的制备工艺研究(2)
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参见附件。
3.2醇沉工艺正交试验结果见表6，方差分析见表7。
方差分析显示，A，B因素差异显著(P<0.05)；从表6可以看出， 多糖得率最高的工艺为A3B3C3D3，而所得多糖抗补体活性最强的工艺则为A2B3C3D3，为了兼顾多糖得率与活性，按照Z分综合评价法[11]计算多糖得率和抗补体活性综合指标，最佳醇沉工艺为A3B3C3D3，即提取液浓缩至相当于每毫升0.12 g生药，加入4倍体积的90%乙醇，静置24 h。
3.3除蛋白工艺不同浓度的三氯乙酸对鱼腥草多糖中蛋白的清除效果见表8。
方差分析显示，C，D因素差异显著(P<0.05)；按照正交试验中Z分综合评价法[11]计算综合指标，综合评价鱼腥草活性炭脱色过程各因素对糖损失率和色素去除率的影响，优化的脱色工艺为A3B1C3D3，即50 ℃，pH 3.0，加入3%的活性炭吸附50 min。
由于正交设计表中并无此条件，因此对其进行了验证，结果脱色率达到了60.12%，同时多糖损失率为9.79%，说明此脱色工艺可行。
3.5总多糖的制备及验证试验根据以上结果确定鱼腥草抗补体活性总多糖的制备工艺：药材粉碎，95%乙醇渗漉后晾干，加50倍的水，90 ℃煎煮3次，每次2 h。提取液浓缩至相当于每毫升0.12 g生药，加入4 倍体积的90%乙醇，静置24 h。离心去上清液，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，再以水复溶；复溶液加入三氯乙酸至20%(体积分数)，于4 ℃下静置2 h，10% NaOH调pH至7，离心，取上清。所得上清液用0.1 mol·L-1的盐酸调pH 至3.0，于50 ℃下，加入3%的活性炭吸附50 min，离心，取上清液，浓缩，透析，冻干。按该工艺平行试验3次，试验结果见表11，证明该工艺稳定。
4讨论
本实验系统研究了鱼腥草多糖的提取、醇沉、除蛋白及脱色整套制备工艺，而且在提取、除蛋白和脱色工艺研究中 ......
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