1株选择性降解茅苍术挥发油内生真菌的筛选与鉴定(2)
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参见附件。
27 内生真菌在组培苗中的回接与重新分离
将分离所得内生真菌经PDA培养基活化后，用接种铲挑取一小块(直径05 cm左右)回接到已生根的茅苍术无菌苗，共培养3周。待菌与苗长成一片后，取出无菌苗，洗净，表面消毒后重新分离。
28 正交试验
选择对菌株代谢挥发油影响较大的碳源、转速、装液量和初始pH 4个常见生态因子进行L9(34)正交试验(表1)。以挥发油含量(μg·g-1)为指标，考察内生真菌与其他生态因子对其影响及对β桉叶醇降解影响。
29 数据统计
试验结果用±s表示，应用SPSS 130软件进行方差分析(OneWay ANOVA) 检验处理间差异显著性，并用Duncan 法进行多重比较，当P≤005时，各个处理间存在显著差异。使用Excel 2003进行作图。
3 结果
31 菌株的分离和筛选
利用纯培养方法从茅苍术根内分离获得27株内生真菌，将27株菌和实验室保藏菌株AL4，AL10，AL11分别做液体培养试验，分离到1株可以利用挥发油为唯一碳源生长的菌株(图1)，初步确定为有效降解挥发油菌株，编号为ALG13。用挥发油作为唯一碳源，接种分离得到的菌株，研究其降解曲线。从图1可以看出，挥发油含量从第0天到第8天为快速降解期，之后平稳下降；生物量同样从第0天到第8天为快速积累期，并于第8天达到最大值。这表明菌株到第8天时降解效果最好，生物量的积累和挥发油的快速降解是同时进行的2个过程。以后降解均取第8天作为取样点。
32 挥发油各组分的含量变化
将菌株接入以挥发油为唯一碳源的查氏培养基中进行发酵培养后，挥发油中4种主要活性成分的含量发生了不同程度改变。接菌处理中，4种主要成分的总量到第8天时降解最快(71%)。与其他组分相比，β桉叶醇含量显著降低 ......
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