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编号:13175952
高良姜1—脱氧—D—木酮糖5—磷酸还原异构酶cDNA克隆与表达调控(2)
http://www.100md.com 2012年11月1日 《中国中药杂志》 2012年第21期
     2.2.3 DXR全长cDNA的获得 应用DNAMAN软件,将DXR EST序列、5′-末端序列和3′-末端序列进行拼接,获得cDNA全长序列。

    2.3 PCR产物克隆与测序 PCR割胶纯化后与pGEM-T载体(Promega,美国)连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞(天根,北京)。将蓝白斑筛选和PCR阳性菌落交上海生工生物工程有限公司测序。

    2.4 生物信息学分析 用Lasgene软件的EditSeq程序查找cDNA的开放读码框,并翻译成氨基酸序列。应用BLASTp程序(http://blast. ncbi. nlm. nih. gov/Blast. cgi)进行蛋白质序列同源性分析,TargetP程序(http://www. cbs. dtu. dk/services/TargetP/)分析蛋白质亚细胞定位。在线搜索蛋白质序列模式数据库PROSITE(http://prosite. expasy. org)分析蛋白质功能位点。应用PROFphd程序(http://www. predictprotein. org/)分析二级结构 ......
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