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编号:13158897
丹参SmNAC1基因的克隆和生物信息学分析(2)
http://www.100md.com 2013年7月1日 《中国中药杂志》 2013年第13期
     2.4 丹参毛状根中SmNAC1表达谱分析 采用SYBR Green Premix染料(TaKaRa公司)进行qRT-PCR分析,以丹参β-actin作管家基因,分别以特异性引物SmNAC F:5′-CTCCCAACATCAGTCAAG-3′,SmNAC R:5′-ATGGCGGTGACGAT-3′,检测SmNAC1在YE+Ag+处理丹参毛状根0,2,4,8,12,24 h的表达变化。PCR体系为 SYBR Premix TaqTM 5 μL,正反引物各0.2 μL,ROX Reference Dye II 0.2 μL,稀释10倍的cDNA模板1.0 μL,加ddH2O至10 μL。PCR程序为,95 ℃ 30 s,95 ℃ 5 s,60 ℃ 34 s, 40个循环,增加溶解曲线。每个样品设3个生物学重复。

    3 结果

    3.1 丹参SmNAC1基因序列分析 丹参SmNAC1基因全长591 bp,编码196个氨基酸。Blastx检索结果显示,SmNAC1与野生马铃薯Solanum chacoense的NAC1,番茄S. lycopersicum NAC1-like,烟草Nicotiana benthamiana NAC1 ......
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