3 结果与分析

    3.1 IC-RT-PCR扩增 用TMV抗血清捕获抗原来获得TMV的RNA，进行IC-RT-PCR，均扩增出了约300 bp的预期目的条带，见图1。将经过脱毒处理的试管苗也进行IC-RT-PCR，得到预期目的条带的株系说明未脱除TMV，而没有扩增出片段的株系说明脱除了TMV，检测结果见图2。

    3.2 PCR产物的序列分析 将TMV的IC-RT-PCR的扩增产物进行测序，获得了TMV扩增产物的核苷酸序列，测序结果获得的片段长度为276 bp，与已报道的地黄TMV CP基因(GenBank AY555269)的核苷酸序列的同源性比较，其同源性达95.29%，将其翻译为氨基酸见图4，氨基酸同源性达96.7%，仅有3个氨基酸有差异，见图5。说明扩增出的产物确为TMV的特异性片段，此方法可以用于怀地黄的TMV检测。

    4 讨论

    地黄病毒病是一种系统性感染疾病，可随地黄的无性繁殖过程持续传播。病毒在地黄机体中大量增殖，严重影响了地黄细胞的正常代谢活动 ......