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编号:13156918
红树林木果楝属植物可培养内生真菌的多样性及其代谢产物抗肿瘤活性(2)
http://www.100md.com 2013年7月15日 《中国中药杂志》 2013年第14期
     用BioEdit软件分析序列,将18S rDNA-ITS序列在NCBI数据库进行比对分析(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi),从GenBank中找到相关种属同源性最高、有效发表的rDNA-ITS序列信息,用MEGA5软件中Clustal W功能对ITS序列进行比对分析,用邻接法(NJ法)构建系统发育树,并进行1 000次重复的自展检验[13]

    2.3 体外抑制肿瘤细胞生长活性评价 将得到的菌液部分用2倍体积乙酸乙酯萃取1次,将萃取液用滤纸过滤并浓缩至干,得到粗提物,用DMSO将粗提物浸膏稀释到25 mg·L-1,采用体外细胞毒MTT法测定发酵液提取物抑制肿瘤细胞生长活性。所用肿瘤细胞株分别为:人结肠癌细胞HCT-116、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞BGC823、人肺癌细胞A549和人卵巢癌细胞A2780。将对数生长期的细胞,用0.25%胰酶-EDTA消化后,配制成一定浓度的单细胞悬液,根据细胞生长速度的差异,按每孔1500个接种于96孔板 ......
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