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编号:13156824
小儿腹泻外敷散对胃肠动力学的影响(2)
http://www.100md.com 2013年7月15日 《中国中药杂志》 2013年第14期
     2.5 小儿腹泻外敷散对大鼠小肠组织SP, VIP含量的影响 分组及给药:取大鼠50只,分成5组,阴性对照组、模型组、药物低剂量组(0.1 g),药物中剂量组(0.2 g)、药物高剂量组(0.4 g)。大鼠单笼饲养,笼底垫有滤纸,先用20%的番泻叶水煎液灌胃,剂量2 mL·100 g-1,4 d后造成虚泻模型,第5天开始敷药,各组连续敷药5 d,每天1次,敷药4 d后,开始饥饿12 h至第5天最后1次敷药后,麻醉。

    组织处理:取距幽门2.0 cm的上段小肠,冲洗干净,液氮冷冻,-80 ℃冰箱保存,用时取组织10 mg,加1 mol·L-1醋酸0.5 mL,煮沸10 min后组织匀浆,再加1 mol·L-1 NaOH 0.5 mL中和,冷却后4 ℃离心30 min(3 500 r·min-1),吸取上清液,-20 ℃冰箱保存待测[7]

    测定方法:按说明书方法在每个测定管中依次加入不同稀释浓度的标准品、待测样品及抗体,4 ℃温育24 h,加入125Ⅰ标记的SP(VIP),继续4 ℃温育24~48 h后,每管加活性炭混悬液0.5 mL,充分混匀,室温放置20 min后,4 ℃离心20 min(3 500 r·min-1)吸弃上清液 ......
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