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编号:13151472
青藏高原甘西鼠尾草内生放线菌抗性菌株筛选(2)
http://www.100md.com 2013年10月1日 《中国中药杂志》 2013年第19期
     PCR产物的检测:16S rDNA扩增产物用0.8%琼脂糖凝胶(含EB)电泳检测。分别将3 μL PCR产物与1 μL 0.25%溴酚蓝混合点样,100 V电泳30 min。凝胶成像系统下观察,检测扩增片段的长度和浓度。将扩增产物送上海快基生物科技有限公司测序。将获得的16S rDNA序列与GenBank中的已知序列进行比对,找到待测16S rDNA的高度同源序列及其相关信息。用ClustalX 1.81进行多序列比对,进化距离用PHYLP软件包中的DNADIST程序计算,系统发育进化树用MEGA5.1的Neighbor-joining法[16]构建。

    3结果与分析

    3.1甘西鼠尾草内生放线菌分离情况 用4种分离培养基共从甘西鼠尾草分离获得内生放线菌24株。其中改良高氏2号培养基分离效果最佳,共获得10株放线菌;其次是腐殖酸培养基,共分离到6株放线菌;S培养基和海藻糖-脯氨酸培养基分离效果最差,分别只分离到4株放线菌。另外,从甘西鼠尾草根、茎、叶分离获得的内生放线菌数量也存在差异 ......
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