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编号:13151558
人参多糖介导Wnt/β—catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE—2的凋亡(2)
http://www.100md.com 2013年10月1日 《中国中药杂志》 2013年第19期
     2方法

    2.1CCK8法测定GPS对CNE-2细胞增殖的影响 细胞培养至对数生长期时进行实验,制备成约为5×104个/L的细胞悬液,每孔加入100 μL细胞悬液接种于96孔板中,24 h后加入100 μL含不同浓度GPS的培养液,分为对照组(常规培养)和0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1终浓度GPS处理组(每组设5个复孔)。分别于24,48,72 h 3个时相进行CCK8比色实验。每次于处理结束前4 h,每孔加入CCK8溶液10 μL,继续培养4 h后,在450 nm处进行吸光度A测定。计算各实验组抑制率=(1-A实验组/A对照组)×100%。此实验重复3次。

    2.2Annexin-V/PI双染法测定GPS对CNE-2细胞凋亡的影响 人鼻咽癌细胞CNE-2常规培养至对数生长期,换无血清培养液培养12 h使细胞周期同步化,设0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1GPS组和对照组,培养48 h后,收集对照组及各浓度GPS组所有细胞 ......
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