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编号:13149456
琥珀酸对原代心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用(2)
http://www.100md.com 2013年11月1日 《中国中药杂志》 2013年第21期
     IC=(A0、5% DMSO组-A加药组)/A0、5% DMSO组×100%

    2、3 心肌细胞缺氧复氧损伤模型及体外加药 参考文献复制心肌细胞缺氧复氧损伤模型[5-7],具体如下:①缺氧:取出35 mm培养皿,弃去培养液,无糖台氏液洗细胞3次,每孔加入预先以95%N2-5%CO2混合气饱和15 min的无糖台氏液2 mL。将培养皿敞盖放入自制缺氧盒中,通入95%N2-5%CO2混合气(流速1 L·min-1),通气15 min后,夹闭进气管和出气管并将缺氧盒置于细胞培养箱内3 h进行缺氧。②复氧:打开缺氧盒,取出培养皿,吸出缺氧液,每皿加入2 mL含2、5%胎牛血清的DMEM液,置培养箱内继续培养2 h(用于LDH检测)或6 h(用于流式,cleaved caspase-3,Akt及p-Akt蛋白表达)。

    药物以DMSO溶解,按照1∶1 000的比例加入培养上清液,分别在缺氧开始和复氧开始时各加药1次。正常组细胞给予含相应DMSO及糖的台氏液 ......
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