2.3 聚丙烯酰胺电泳 5%非变性聚丙烯酰胺凝胶(丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺29∶1)，上样量5 μL(样品 6×上样缓冲液 5∶1)。电泳条件 Bio-Rad垂直电泳仪(美国Bio-Rad公司) 1 000 V，150 min。

    2.4 DALP银染 本实验采用快速银染法：①固定液(10%乙酸)洗脱直至溴酚兰颜色褪去，超纯水洗3次，每次不少于2 min。②染色液(0.1%的硝酸银，0.4%的甲醛) 染色40 min；水洗2 s立即拿出。③在显影液(3.0%碳酸钠，显影前加入0.4%甲醛，0.02% 10 g·L^-1(硫代硫酸钠)中显影至带纹清晰，固定液(10%乙酸)固定5 min，超纯水洗10 min自然晾干，电泳图见图1。

    图1 DALP电泳式样

    Fig.1 The electrophoresis pattern of DALP

    2.5 数据统计分析 利用Kodak 1D 分析软件分析，每个样品的扩增带按有或无记录 ......