竹节参总皂苷通过NF—κB 通路对LPS致RAW264.7细胞炎症的保护作用研究(2)
2.2 细胞活力检测 RAW264.7细胞悬液接种96孔板,细胞数为1×104个/mL,每孔100 μL,设置调零孔、正常组(细胞+培养基)、竹节参总皂苷组,给药质量浓度为5,10,20,40,80,100,200 mg·L-1,每组4个复孔,24 h后吸取上清液,在每孔中加入终浓度为0.5 mg·L-1MTT的培养基100 μL,继续培养4 h,然后将上清去掉,每孔加入150 μL DMSO,置摇床上低速震荡10 min,使结晶充分溶解,在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光度A。2.3 一氧化氮(NO)检测和细胞因子检测 RAW264.7细胞悬液接种24孔板,细胞数为1×105个/mL,每孔1 mL,同时加入不同浓度的竹节参总皂苷(质量浓度为0.1,1,10,40 mg·L-1)和1 mg·L-1 LPS[2]作用细胞 ......
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