2.3 M1型巨噬细胞的诱导刺激及参莲提取物的作用 干预前 12 h 以 1×10⁵个/mL密度铺细胞于6孔板，以2 mL完全培养基培养。待细胞完全贴壁且生长状态良好时加入2.5 μg·L^-1IFN-γ和200 μg·L^-1 LPS共同刺激培养12 h，诱导M1型巨噬细胞的形成[9-10]。诱导后加入不同浓度的参莲提取物作用12 h，药物浓度根据IC₅₀进行设置。

    2.4 流式细胞术检测M1型巨噬细胞细胞膜CD86蛋白表达 诱导、药物作用后以细胞刮将细胞刮除，1×10⁶个/管，PBS洗1次，100 μL PBS重悬，加入1 μL的FITC标记的大鼠抗小鼠CD86抗体，4 ℃避光共孵育30 min，PBS洗去游离的抗体，用300 μL PBS重悬后，流式细胞仪检测细胞表面CD86的表达。

    2.5 总RNA的提取及RT-PCR 提取方法参照试剂盒说明书进行 ......